실험 제목 : 인체와 공기 중의 미생물 배양
1. 실험 목적
: 신체의 많은 부분과 공기 중에 세균이 있다는 것을 배지를 통해 관찰함으로써 미생물 실험에서 신체의 접촉을 최소화하고 공기 중의 노출을 줄이는 조심성을 습득한다.
2. 실험 원리
: 우리 눈에는 보이지 않지만 대기 중에는 상당한 수의 미생물이 존재한다. 공기 중에 존재하는 대표적인 미생물군은 주로 세균과 곰핑이로 공기 중 미생물 수의 합계는 대략 1m^2당 10^4 CFU/ml 이며 그중 세균 (bacteria)이 가장 많이 존재한다. 공기 중의 미생물은 일반적으로 토양 미생물이 바람에 날리거나 수생 미생물이 분무 등에 날려 공기 중에 존재하게 된 것이다. 또한 인체 중에는 피부, 비인두, 구강, 소화관 등에 미생물이 존재한다. 평판 배지 (PDA, TSA)를 이용하여 공기 중의 미생물을 배양하고, 인체 (신체 각 부위)에 있는 미생물을 배양 관찰하여 어떤 균인지 알아본다.
3. 실험 재료
-Potato dextrose agar (PDA) for the cultivation and enumeration of yeast, filametous fungi (molds) from food
조성 (1L 당) Potato infusion solids 4g, Dextrose 20g, Agar 15g, pH 5.1 +- 0.2 at 25'c
121'c (15psi)에서 15 min 멸균 후 사용
- Tryptic soy agar (TSA) for use of a wide variety of microorganism
조성 (1L 당) Tryptone (pancreatic digest of casein) 15g
Soytone (Pancreatic digest of soybean meal) 5g
sodium chloride (NaCl) 5g
Agar 15g
pH 7.3 +- 0.2 at 25'c
121'c (15psi)에서 15 min 멸균 후 사용
4. 실험 방법
1) 공기 중의 곰팡이 확인
PDA 배지 뚜껑을 1-2h 열어놓았다가 닫은 후 배양
2) 인체의 미생물
신체의 각 부위에서 직접 또는 살균 면봉을 이용하여 Tryptic soy agar (TSA)에 도말 (streaking) 후 30'c에서 24 - 48h 배양
5. 실험 결과
PDA 배지에 공기 중의 미생물을 배양하기 위해 뚜껑을 열어두었다.
평판 배지 (PDA, TSA)에 인체의 미생물을 배양하였다.
TSA 배지에 머리카락과 지문에 있는 미생물을 배양했다.
(사진 생략)
6. 고찰
평판 배지에 지문 찍은 자리를 보면 미생물이 배양된 것을 확실히 관찰할 수 있었다.
PDA 배지와 TSA 배지에 배양된 미생물의 색이나 형태가 다를 줄 알았는데 차이가 없었다. PDA 배지는 pH 5.1 +- 0.2 의 약산성을 띄기 때문에 진균류 (곰팡이)가 잘 배양되며 박테리아는 증식하기 어렵다. TSA는 어느 종류든 잘 배양된다.
원핵세포와 진핵 세포의 가장 큰 차이점은 핵의 유무이다. 원핵세포는 핵이 없지만 진핵 세포는 핵을 가지고 있다. 원핵생물에는 박테리아가 있고 진핵 생물에는 식물, 동물, 진균류 (효모, 곰팡이)가 있다.
7. 참고문헌
일반미생물학 실험 교재
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